RACE和RTPCR的结果分别会得到什么?

RACE是已知RNA的中间段序列,所以通过已知序列和特定的人工连接序列(合成RNA片段)用PCR扩增3’和5’端,然后测序。以便获得全长。这里有一张图片。

http://thunder . BIOS ci . umbc . edu/classes/biol 414/spring 2007/index . PHP/RACE

RT-PCR就是先把RNA逆转录成cDNA,再做PCR。你不必得到完整的长度。可以是任何中间段落。这取决于底漆的位置。

补充回答:

另外,RACE通常是从mRNA两侧的同源序列设计引物吗?保守序列两边都不是怎么办?是不是把3’和5’末端序列[从中间开始]扩增,测序,拼接后再设计引物再次进行PCR?所以你得到的是一个完整的cDNA?

RACE两边的引物是根据人工连接的RNA片段设计的。不是保守序列。

既然RT-PCR不一定能得到全长,那么片段通常用来做什么?

1。看基因是否表达。2。比较表达量(如实时定量PCR)

RACE和RT-PCR设计的引物有相似之处吗?

在RACE的一对引物中,cDNA本身只有一个序列,而且常常位于末端。而RT-PCR,两者都是针对cDNA序列的,往往至少有一个要穿过外面的内含子连接区。一般没有相似之处。