L929细胞是怎么在材料上长成这样的?

L929细胞是怎么在材料上长成这样的?

L929是小鼠成纤维细胞系,常用于检测TNF-α和TNF-β。TNF的治疗经常导致细胞凋亡和死亡,因此L929细胞经常用于免疫测定。然而,转染L929细胞非常困难,尤其是使用基于脂质体技术的转染试剂。我们用GenJet Ver和PolyJet转染L929细胞,获得了75%的转染效率。简单的实验步骤如下。

1.转染时保证L929细胞融合度达到80%,细胞必须健康,传代不超过9代。

2.对于6孔板,1.0μg DNA和3.0μl Genjet Verⅱ或PolyJet转染试剂分别用无血清DMEM稀释。向DNA中加入稀释的转染剂,室温放置65438±05分钟,形成转染复合物。其他细胞培养容器可以根据表面积调整DNA含量。

3 .将转染复合体直接加入L929细胞中;在存在血清/抗生素的情况下转染6孔板,每个板含有1.0ml培养基。

4.转染后24~48小时,监测转染基因的表达。