如何收集和识别植物病害?
材料和用具:标本夹、吸水纸、塑料袋、纸袋、标签、铅笔、记号笔、小刀、剪刀、手锯、标本罐、乙醇酸铜、硫酸铜、95%乙醇、甲醛溶液、亚硫酸、甘油、蒸馏水等。
内容和方法
(1)疾病标本的收集
1标本采集的基本要求
要采集完整的标本,最好是先拍照,然后按压或浸泡保存。照片越清晰越好。需要拍摄正常植物和患病部位。对于每个标本,至少应采集2-3个样本。
2取样地点
(1)如果标本上有子实体,应尽量采集在老叶上。
因为是成熟的,很多真菌有性阶段的子实体出现在枯枝落叶上,而无性阶段的子实体可以在活体中找到。
(2)对于柔软多汁的子实体或果料,应采集新发病的幼果。
(3)病毒病应尽量采集顶部和新叶。
(4)线虫病标本应采集患病组织,危害根系的线虫病标本应采集除根系外的根系周围土壤。
(5)萎蔫的植物要连根挖起,有时要和根际土壤一起收集。
(6)对于较粗的枝条和植物,宜剪一截或切一截。
(7)如果病害表现在叶、果、枝上,尽量综合收集。
(8)寄生虫应与宿主一起收集。有特殊症状的病害应与植物的枝、叶或花一起收集,以便鉴别和确定其寄主名称。
3标本数据记录和标本编号
记录应准确、简明、完整。完整的记录和标签同样重要,主机名、
采集日期和地点、采集者姓名、生态条件和土壤条件等。
4标本采集方法
(1)收集树枝和树根的病害标本
用锯、枝剪或高枝剪取患病部位。不要用手掰,会影响标本的美观。要特别注意纤维长而结实的枝条。
(2)叶部病害标本的收集
大叶植物,其叶片和花序都很大,采集标本时可部分或分段采集,一个标本由同一株植物上的幼叶和花组成(同时注明叶片的实际大小);或者分别取一部分叶子和叶柄;
菟丝子、豆科等寄生植物应与寄主一起采集,并记录寄主名称。(3)肉质或多汁植物(花和果实)的病害标本的收集
要纵向或横向切开,有时要挖出内部组织,还要考虑是否将一半材料浸泡在保存液中保存。田间晾晒时,要在切好的茎秆表面撒上大量的盐,用盐包裹的材料要放在有多层报纸的标本夹里。24小时后,应将浸泡在盐水中的报纸取出,或将材料用开水烫死,然后放入纸板-铝夹层中晾干。
(2)疾病标本的制备
除了一些从田间采集的样本用于分离鉴定外,最好先对典型的病害症状进行拍照,然后压制或浸泡保存。压制或浸渍后的标本尽可能保持原有的性质,微小的标本可制成玻片,如双层玻片、凹面玻片或收集在其他小玻璃管中。
(3)疾病标本的保存
1干燥法适用于制作茎、叶等病害的标本,用水量少,最简单,最经济,应用最广泛。采集的标本放在吸水纸中,同时放入写有采集地点、日期、宿主姓名的标签。然后用标本夹压住,在太阳下烘烤或加热使其干燥。它们干燥得越快,它们的原始颜色就越好,它们的质量就越高。夏季采集的标本在高温高湿条件下容易发霉变色,宜勤换纸。通常在压纸的前三四天每天换L-2次纸(视标本含水量和温湿度而定),之后每隔两三天换一次纸,直到完全干透。第一次换纸的同时,要把标本整理出来,因为标本经过初步干燥后,变得柔软,容易铺开。烟草、蚕豆、梨、土豆的茎叶容易变黑变色,标本不易保色,制作过程中要特别注意快速干燥。如需保持绿色干燥标本,可将标本浸泡在2-4%的硫酸铜溶液中24小时,或在压制前用醋酸铜溶液处理(配方及方法见浸渍法中醋酸铜的浸渍法)。也可以在叶子上涂一层液体石蜡,然后按压,保持亮绿色2-3天。
2浸泡法适用于肉质病害标本,
担子菌的果实、块茎或子实体必须浸泡保存。浸液有很多种,有些是纯防腐的,有些是用来保持标本本来的颜色。本文介绍几种常用且有效的方法。
(1)防腐浸渍法:这种浸渍法只能防腐不能保色,如萝卜、红薯等。清洗后,不要求保色的标本直接浸入以下溶液中。① 5%福尔马林浸渍溶液。
②硫酸浸渍溶液:在1000毫升水中加入5%-6%的亚硫酸15毫升(一般市场上亚硫酸含量为5-6%)或用10.5克亚硫酸钠、8毫升浓硫酸和500毫升水配成混合溶液。
(2)浸泡溶液和保存绿色标本的方法:
(1)醋酸铜护色浸渍法:将醋酸铜晶体逐渐加入50%醋酸中溶解至饱和作为母液(加入15g醋酸铜可使50%醋酸约1000ml饱和),使用时用水稀释1-4倍(稀释倍数视标本颜色而定,颜色深者稀释倍数可小一些)。将该溶液加热煮沸,并放入标本中。首先,标本的绿色被去除,然后标本在几分钟后恢复绿色。此时,立即取出标本,用清水冲洗,保存在5%福尔马林溶液中。这种方法叫做热处理。冷处理的方法是将标本浸泡在上述稀释液中3小时,然后标本会褪色,72小时后标本恢复绿色。此时,标本将被取出,用水冲洗并保存在5%的福尔马林溶液中。这种方法保色时间长,其护色原理大致是叶绿素中的铜离子取代镁离子。所以溶液经过多次处理后,铜离子会逐渐减少。如果要继续使用,要加入适量的醋酸铜。用这种方法保存的标本往往略呈蓝色,与植物标本的本来颜色略有不同。
(2)硫酸铜保色浸渍法:用清水冲洗标本,直接浸泡在5%硫酸铜溶液中1-7天,待标本呈棕褐色时取出用清水冲洗,除去标本表面多余的硫酸铜溶液,再保存在亚硫酸浸渍液中。
(3)保存黄色和橙色样品的浸渍液:保存杏、梨、柿子、红辣椒等水果样品,用亚硫酸浸泡。
酸洗液和亚硫酸浸渍液有漂白作用,使用时要注意浓度,一般1%即可(泡杏子时浓度可以更稀)。因为浓度太小,耐腐蚀性不够,可以加入适量的酒精。为了防止水果开裂,可以加一点甘油。
(4)保存红色标本的浸渍液:标本的红色很难保存,因为红色是一种水溶性的花青素,很难保存。通常保存在赫斯勒浸渍液中,其成分为:氯化锌50g,福尔马林25ml,甘油25ml,水1000ml。将氯化锌溶于热水中,加入福尔马林,如有沉淀则用其清液。该溶液适用于因花青素而呈红色的样品,如苹果和番茄。
(4)标本的保存
将准备好的标本进行分类登记,然后按照一定的制度进行整理保存。
真菌标本一般按照分类系统排列,要有两套索引卡片,一套是寄主索引,一套是真菌索引,方便查找、拖动和整理。
标本室(柜)应保持干燥、宽敞,定期施药,防止虫蛀、霉变。
1标本盒更便于存放干燥的疾病标本,用于教学和演示,玻璃纸盒的合适尺寸为20×28×2 cm。先在纸箱里铺一层棉花,棉花里加一点樟脑粉驱虫。最后,在棉花上贴上样品和标签。
2标本瓶保存浸渍后的标本保存在标本瓶中。为了防止标本下沉和漂浮,可以将标本绑在玻璃条上,然后放入标本瓶中。标本瓶瓶盖合上后,加入石蜡密封,然后贴上标签。
3纸套用牛皮纸叠起来,形成15×33cm的纸套,大量干燥的标本大多保存在纸套中。将标本放入纸套中,在纸套上贴上标签,放入标本柜中。